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大鼠血管緊張素1-7ELISA試劑盒檢測原理和購買指導

更新時間:2015-08-21      瀏覽次數:1433

    血管緊張素Ⅰ是由腎素作用于血管緊張素原轉變而來,因此可反映腎素活性。腎素-血管緊張素-醛固酮系統對維持血壓、水和電解質平衡、內環境穩定起重要作用。

   為了研究血管緊張素Ⅰ型受體(ATl)反義(AS)寡核苷酸(ODN)對大鼠腎臟局部腎素-血管緊張素系統(RAS)的阻斷作用,研究者采用單側腎動脈注射+原位電穿孔的方法,將AT1 AS-ODN導入到Wistar大鼠的一側腎臟,觀察以FITC熒光標記的ODN在腎臟的轉移位置,以AT1放射自顯影定量分析的方法觀察轉移基因的時間-效應曲線。在基因轉移3 d后以RT-PCR、Western印跡及免疫組織化學方法檢測腎臟AT1的mRNA和蛋白表達與分布,并與正義(Sen)ODN轉移、假注射+腎臟原位電穿孔(Sham)作為對照。結果FITC標記的ODN在基因轉移10 min后主要定位于轉移側腎臟的腎小球,而對側腎臟FITC熒光陰性。AT1放射自顯影定量分析顯示在基因轉移后的3 d內,結合有血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的AT1較未轉移的對側腎臟減少約70%。AT1 AS-ODN基因轉移后3 d,轉移側腎臟AT1 mRNA水平較對側腎臟下降約43%,蛋白水平下降約67%,而與AT1 Sen-ODN和Sham組轉移側腎臟比較,AT1的mRNA水平下降分別約47%和51%,蛋白水平下降分別約63%和71%。免疫組化檢查發現AT1的阻斷以系膜區的表達減少為主。可見本研究所用的單側腎動脈注射+原位電穿孔的基因轉移方法成功地抑制了單側腎臟的腎小球AT1受體的表達,為研究全身性疾病腎損害中腎臟局部RAS的短期作用機制提供了一個比較理想的整體動物模型。

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