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祝賀北京中醫(yī)藥大學朱躍蘭教授研究出用如何編輯miRNA

更新時間:2015-12-28      瀏覽次數(shù):1920

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近日,由北京中醫(yī)藥大學朱躍蘭教授和北京大學的研究人員在《BioMed Research International》雜志上發(fā)表了一項研究成果,報告稱,她們采用CRISPR/CAS9介導基因組編輯miRNA-155,成功抑制了小鼠巨噬細胞系RAW264.7細胞中的促炎性細胞因子生成。

在這篇新文章中,研究人員成功利用CRISPR/CAS9技術(shù)生成了miR-155基因組敲除(GKO) RAW264.7巨噬細胞系。這一miR-155 GKO細胞系顯示SHIP1水平增高,在NF-κB受體激活蛋白配體(RANKL)處理的條件下促炎性細胞因子生成顯著受損,而破骨細胞生成略有升高。這些結(jié)果表明,基因組編輯miR-155有潛力成為類風濕性關(guān)節(jié)炎的一種治療策略。

類風濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種累及關(guān)節(jié)的自身免疫性炎癥疾病。該病的特點是:巨噬細胞和淋巴細胞浸潤,滑膜成纖維細胞增殖,及zui終關(guān)節(jié)損傷與破壞。據(jù)報道有2100多萬人受累于這一疾病。巨噬細胞在類風濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病中起重要作用。類風濕性關(guān)節(jié)炎炎癥滑膜中的巨噬細胞數(shù)量高于正常關(guān)節(jié),與關(guān)節(jié)疼痛和炎癥嚴重程度呈正相關(guān)。盡管一些藥物已獲得批準用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎,當前尚未廣泛探索基因或細胞療法(延伸閱讀:新靶向療法或可治愈類風濕性關(guān)節(jié)炎 )。

micrornA 155 (miR-155)存在于小鼠16號染色體及人類21號染色體上的BIC基因內(nèi)。在臨床及實驗?zāi)P椭衜iR-155一直確定與類風濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病有關(guān),它在來自類風濕性關(guān)節(jié)炎患者的滑膜及滑液巨噬細胞中上調(diào)。通過siRNA敲低miR-155可抑制一些促炎性細胞因子生成。miR-155通過多層面機制參與了類風濕性關(guān)節(jié)炎形成,其中一個就是miR-155靶向了炎癥負調(diào)控因子SHIP1的3′非翻譯區(qū)。因此,在類風濕關(guān)節(jié)炎中增高的miR-155可導致SHIP1水平降低,促進生成促炎性細胞因子。

朱躍蘭教授課題組試圖利用CRISPR/CAS9基因組編輯技術(shù)來操控miR-155表達,以緩解類風濕關(guān)節(jié)炎中的炎癥。CRISPR系統(tǒng)依賴于CRISPR RNAs (crRNAs)與Cas蛋白形成的復合物來引導降解入侵病毒和質(zhì)粒DNA中的互補序列。近期的一些研究優(yōu)化及改造了這一系統(tǒng),使得單個導向RNA (gRNA)可以引導CAS9蛋白改造基因組靶位點。換句話說,這一細菌II型CRISPR系統(tǒng)現(xiàn)在適用于特異性改造人類細胞中的基因組DNA。隨著原代細胞和干細胞技術(shù)的進步,這類新的基因組工程工具將幫助構(gòu)建出適用于基礎(chǔ)研究的新細胞系及推動基因治療。

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