久久久91精品国产一区二区三区_另类亚洲专区_成人理论片_日韩视频在线观看_亚洲成年人网站在线观看_麻豆网址

技術文章/ ARTICLE

我的位置:首頁  >  技術文章  >  教你配置ELISA試劑盒實驗中的常用試劑

教你配置ELISA試劑盒實驗中的常用試劑

更新時間:2017-02-06      瀏覽次數:1967

  ELISA試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:

1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;

2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。

4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。

封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。

封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。

tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現YY-

附:ELISA實驗中緩沖溶液等試劑的配置

ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總如下:(1) ELISA實驗包被緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(3) ELISA實驗稀釋液;(4)ELISA實驗終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液(7) ELISA實驗ABTS使用液(8)ELISC。

試劑

(1) ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):

NaHCO3 1.59克

NaHCO3 2.93克

加蒸餾水至1000ml

(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M

KH2PO4      0.2克

Na2HPO4·12H2O 2.9克

NaCl       8.0克

KCl       0.2克

Tween-20 0.05% 0.5ml

加蒸餾水至1000ml

(3) ELISA實驗稀釋液:

牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

(4) ELISA實驗終止液(2M H2SO4):

蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。

(5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml

加蒸餾水50ml。

(6) ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液:

TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml

底物緩沖液(PH5.5)  10ml

0.75%H2O2 32μl

(7) ELISA實驗ABTS使用液:

ABTS 0.5mg

底物緩沖液(PH5.5)1ml

3%H2O2 2μl

(8)ELISA實驗封閉液:

牛血清白蛋白(BSA) 5克

加洗滌緩沖液至100ml。

值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。

上海信帆生物ELISA相關產品,詳情見:封閉試劑、終止溶液、封閉肽、ELISA稀釋液、ELISA試劑盒、ELISA緩沖液、ELISA洗脫緩沖液

為了保證ELISA實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。

主站蜘蛛池模板: 亚洲欧美另类自拍第一页 | 久久er99热精品一区二区 | 香蕉乱码成人久久天堂爱免费 | 自拍偷自拍亚洲精品被多人伦好爽 | 欧美日韩国产亚洲一区二区三区 | 成人一级片在线观看 | 国产亚洲一区二区三区不卡 | 一区 在线播放 | 亚洲欧美日韩中文字幕一区二区三区 | 国产精品手机视频一区二区 | 国产精品高清久久久久久久 | 欧美日韩三级在线 | 亚洲国产精品嫩草影院久久 | 极品国产高颜值露脸在线 | 亚洲日韩欧美一区二区在线 | 精品久久成人 | 欧美大陆日韩 | 精品欧美成人高清视频在线观看 | 欧美一区二区三区视频 | 国产视频一区二区在线观看 | 图片亚洲va欧美va国产综合 | 国产成人无精品久久久 | 亚洲国产精品综合久久一线 | 欧美高清在线精品一区二区不卡 | 中文在线第一页 | 在线观看国产一区二区三区 | 综合毛片 | 亚洲精品成人久久 | 免费一看一级毛片人 | 日本国产最新一区二区三区 | 欧美精品专区免费观看 | 国产不卡一区二区视频免费 | 久久99久久精品国产99热 | 久久久性| 日韩一级精品视频在线观看 | 亚洲一区二区成人 | 日韩欧美亚| 亚洲国产精品嫩草影院久久 | 亚洲国产精久久久久久久 | 欧美国产精品va在线观看 | 国产日韩欧美第一页 |