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瓊脂粉使用過程中常見的問題,信帆生物為您答疑解惑!

更新時間:2019-08-30      瀏覽次數:2945

瓊脂粉使用過程中常見的問題,信帆生物為您答疑解惑!

 

瓊脂粉是由瓊脂糖(agarose)和瓊脂果膠(agaropectin)組成的,溶解性是瓊脂粉不溶于冷水,易溶于沸水,緩溶于熱水。檢測凝膠強度為1.5%瓊脂粉溶液在20攝氏度凝固后,能夠表面不破承受的大壓強是800-1200g/cm2 在生物學實驗中,微生物培養基、植物組培培養基常規添加瓊脂粉的用量1.5-2% (工作濃度6-25g/L)。當實驗中遇到瓊脂粉不凝固時,常規的檢測方法時pH值,濃度,溫度,充分混勻等情況。

說明:培養基的配制,工作濃度6-25g/L

用途:微生物培養基、植物培養基原材料,一般添加量1.5-2%
瓊脂粉默認使用PH為中性, PH小于4則無法凝結,脂粉質檢凝膠強度為1.5%濃度,800-1200g/cm2

 

常見問題解答:

一,生物實驗中遇到培養基加入瓊脂粉后,室溫不凝固的原因分析:
1、培養基PH值過低 ,偏酸,水解,瓊脂粉在PH值小于4則無法凝結。
2、所加瓊脂粉質量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。
3、滅菌溫度過高,加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
4、培養基沒有加熱溶解充分,就沒有凝固。

問題1:使用瓊脂粉配置的MS培養基顏色明顯變黃?影響實驗?
產品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質量問題,不影響使用。
進口產品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正常現象。

問題2:凝膠強度?
答:凝膠強度(1.5%)≥800g/cm2  800-1200g/cm2,根據不同批次會有不同數值。
1.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時以上,再測定凝膠強度。與溫度,水質等有關。
一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時間久,可能會有部分降解,所以要達到同樣凝膠強度的用量就偏高。

問題3:瓊脂粉不凝固
1、培養基PH值過低 ,偏酸,水解
2、所加瓊脂量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。
3、瓊脂質量不過關,瓊脂條在使用時添加量要稍微高一點,瓊脂粉是不是新買的
4、滅菌溫度過高,加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
5、培養基沒有加熱溶解夠不夠,就沒有凝固。是不是瓊脂加錯了,營養瓊脂不會凝固。到平板時可以推薦在超凈臺內吹干晾干,蒸發過多水分。

 

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