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蛋白酶抑制劑混合物A(100X)使用方法

更新時間:2022-11-09      瀏覽次數(shù):1188

蛋白酶抑制劑混合物A(100X)使用方法


蛋白酶抑制劑(protease inhibitor)從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團(tuán)結(jié)合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。從放線菌發(fā)酵液中分離到亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑彈性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素等,能分別抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶、胃蛋白酶、金屬蛋白酶等各種蛋白酶。都屬于蛋白酶抑制劑。


使用方法

 A: 非磷酸化蛋白的提取:在使用前數(shù)分鐘內(nèi)向WB Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制劑混合物A (S0142),使其終濃度為1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制劑混合物A,混合均勻,進(jìn)行后續(xù)樣品裂解和蛋白提取。

B: 磷酸化蛋白的提取:在使用前數(shù)分鐘內(nèi)向WB Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制劑混合物A 、磷酸酶抑制劑混合物B 、磷酸酶抑制劑混合物C (S0143)各2.5μl,使其終濃度為1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制劑混合物A、2.5μl磷酸酶抑制劑混合物B 、2.5μl磷酸酶抑制劑混合物C,混合均勻,進(jìn)行后續(xù)樣品裂解和蛋白提取 。


蛋白酶是人類免疫缺陷病毒基因編碼中的一種特異天冬酰蛋白酶,其作用是將基因和基因表達(dá)所產(chǎn)生的蛋白裂解,成為具有活性的病毒結(jié)構(gòu)蛋白和酶,是HⅣ病毒復(fù)制的關(guān)鍵物質(zhì)。蛋白酶抑制劑是一種治療艾滋病的化學(xué)同類藥物。


蛋白酶抑制劑是90年代中后期的新產(chǎn)品,藥物合成工藝難度大,也是導(dǎo)致抗HⅣ治療費用居高不下的主要原因,被稱為"必須跨越壁壘"。蛋白酶抑制劑主要有:奈非那韋、沙奎邦韋、茚地那韋、安潑那韋、利托那韋、洛匹那韋及復(fù)合制劑。

是基于肽類的化合物,它們或競爭性抑制蛋白酶活性或作為互補(bǔ)蛋白酶活性點的抑制劑。這類藥物能抑制蛋白酶的活性,其主要作用于艾滋病病毒復(fù)制的后階段,由于蛋白酶被抑制,使之從感染的CD4細(xì)胞核中形成DNA不能聚集和釋放。


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