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野生型鏈霉親和素(wild-type streptavidin, wt-SA)使用方法

更新時間:2025-03-05      瀏覽次數:117

品 名:野生型鏈霉親和素(wild-type streptavidin, wt-SA)

規 格:1 mg ,10 mg ,100 mg ,500 mg

產品形式:冷凍干粉(5mM 磷酸鉀鹽緩沖液、海藻糖,pH 8.0)

分 子 量:四聚體 66kDa,單體 16.5 kDa

活 性:≥11U/mg 蛋白(Green 改良法測定)

純 度:≥95%(SDS-PAGE 檢測)

濃度測定:紫外吸收法,消光系數 E(0.1% at 280 nm)=2.543

來 源:大腸桿菌發酵工程菌株

保存條件:-20℃保存
有 效 期:1 年
相關介紹:
鏈霉親和素(Streptavidin ,SA)是阿維丁鏈霉菌(Streptomyces avidinii)在生長過程中分泌的 一種同型四聚體蛋白。同親和素一樣,一摩爾的鏈霉親和素可以結合四摩爾的生物素,與生物素具 有很高的親和力。由于 SA 不含糖基且等電點接近于中性,因此 SA 在檢測應用中具有比親和素更 低的非特異性結合水平。
該制品已被廣泛應用于多種生物技術領域,諸如:包被免疫檢測用微孔板,制備 SA 偶聯酶制 劑,SA 偶聯熒光素、SA 偶聯磁珠等,進而參與酶聯免疫吸附和酶催化放大實驗,免疫組化化學、 生物分子純化、生物傳感器、生物納米微球、預靶向制藥研究和生物芯片被料等。 (該野生型鏈霉 親和素不帶任何標簽,pI:6.1)

使用方法:(僅供參考)

由于產品生產工藝中凍干環節會引入保護劑等,為減少您的實驗誤差,建議先通過內部檢測方 法,產品中蛋白進行準確定量后,再進行后續實驗,并按實際情況進行產品用量調整。建議優先選擇紫外吸收法進行定量,方法如下:
將樣品從低溫條件下拿出后,平衡至室溫,并擦去瓶外附著的冷凝水,小心打開瓶蓋,防止干 粉飛濺損失。用去離子水或緩沖液進行復溶,充分溶解后,稀釋至合適濃度,小心移入比色皿中, 以去離子水或緩沖液為空白對照,測定樣品在 280 nm 處的吸光值(建議吸光值控制在 0.1-1.5 區間 內),將其代入以下公式計算蛋白質濃度:


式中:C:樣品原液的蛋白質質量濃度(mg/mL)
A280nm :蛋白質溶液在 280nm 處測得的吸光值 N:稀釋倍數

E(0.1% at 280nm) :1 mg/mL 蛋白質的消光系數

例如將本產品凍干粉充分溶解并混勻后,取適量原液稀釋 10 倍,測得其在 280 nm 處的吸光值為 0.7629,則原液的蛋白濃度為 10×0.7629/2.543=3 mg/mL。


注意事項:
1. 鏈霉親和素凍干粉易溶于水,溶解性可達 10 mg / mL 或更高;

2. 建議使用純水溶解;
3. 如有未溶解物質,建議延長復溶時間。也可以通過離心或其他方式除去不溶物后,再用于后 續實驗,不會對總蛋白產生很大的影響。
4. 考慮到蛋白質特殊性,凍干粉建議現用現配,溶解后應避免反復凍融,如需多次使用,建議 按需分裝后凍存(-20℃) ;避免在4℃下長期存放。


Lane 1 :野生型鏈霉親和素單體
Lane 2 :野生型鏈霉親和素四聚體

注意:本產品僅限于科研使用。 

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