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肝素親和素填料使用
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  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2024-04-19
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簡要描述:

肝素親和素填料使用:Heparin NUPharose FF和 Heparin NUPharose HP是肝素親和填料, 是 在 紐龍生物經
典的瓊脂糖凝膠層析介質基球 NUPharose上鍵合 肝素 而成。 FF為 Fast Flow的縮寫,具
備快流速的特點,可用于快速純化蛋白質,適用性廣,易于放大。 HP為 High Performance的縮寫,具備分辨率高的特點。

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肝素親和素填料使用

產品 介紹

Heparin NUPharose FF和 Heparin NUPharose HP是肝素親和填料, 是 在 紐龍生物經典的瓊脂糖凝膠層析介質基球 NUPharose上鍵合 肝素 而成。 FF為 Fast Flow的縮寫,具備快流速的特點,可用于快速純化蛋白質,適用性廣,易于放大。 HP為 High Performance的縮寫,具備分辨率高的特點。 肝素親和的原理較為復雜, 一般認為 肝素與蛋白的結合是離子相互作用、氫鍵與 范德華力 等多種驅動力共同作用的結果。 肝素填料 主要用于凝血酶 III、凝血因子、脂蛋白、酯酶、激素、干擾素等的分離純化。 也有 文獻報道將肝素填料用于外泌體的純化。產品保留了瓊脂糖極好的親 水性及大網架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高,非特異性吸附少,流速快等特點, 適用于各種肝素親和層析。


肝素親和素填料使用

使用方法 參考

1、色譜柱裝填

以下闡述與層析系統連接時,填料的色譜柱裝填方法。

1 所有需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣,液體最好做脫氣處理。

2)填料 用量計算: 通過沉降定量填料體積, 需要的沉降 填料 體積 =柱體積× 壓縮比(也稱壓縮因子) 。 沉降體積是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降 完全 讀取的穩定體積。 Heparin NUPharose FF的壓縮比為 ~1.15 Heparin NUPharose HP的壓縮比為 ~1.20。為使達到裝柱比,可通過柱頭下壓的方法,也可以通過高流速 壓柱。

3)填料 清洗: 將 填料 懸液充分搖勻后量取 相應體積, 抽去液體,并用約 3倍填料體積的 純化水洗滌,重復 3次 ,以除去保存液 。

4)裝柱 填料 懸液準備:將 填料 轉移 到 適當的容器中,加入 適量的裝柱液, 制成50~75 v%的裝柱 填料 懸液 原包裝中填料體積 分數 為 使用前 攪勻。

5 裝填 前準備: 在 清洗干凈的層析柱 下端加入 裝柱液 ,以除去 下墊片及層析柱下端 的空氣,在柱內保留少量的蒸餾水 擰緊下堵頭,調整柱子使其垂直于地面。

6 裝填 將攪勻后的 填料 懸液一次性緩慢倒入層析柱內(必要時使用裝柱器)為避免引 入氣泡 ,應使之沿層析柱內壁自然流下 。 將所有填料加入后, 用裝柱液將裝柱器加滿,擰緊裝柱器上蓋,將 柱子 與層析系統連接。

7)壓柱:使柱內填料自然沉降(或 50~150 cm/h的 低 流速下沉降),待填料沉降完全后(填料與液體的界面清晰),去除 裝柱器 裝上上柱頭, 并 將柱頭下降至 界面 處通過 高 流速( 推薦流速見下表, 注意 柱壓不超過 0.3 MPa 繼續 壓柱至 界面 清晰穩定,標記 界面 穩定時的柱高。 停泵,打開柱頭上的閥門 /堵頭,關閉柱底的閥門 /堵頭,下壓柱頭至標記位置 下方與壓縮比對應的位置 ,旋緊柱頭,裝柱完成。 裝柱完成后,需 用高流速平衡柱內的填料 。


填料保存

填料的初始保存液為 20%乙醇, 含 50 mM醋酸鈉 使用過后可繼續用 相同的保存液 。 保存溫度在 4~8 ℃為宜 不可凍存 。

肝素親和素填料使用



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